Fibras de estres de actina microscopia electronica de transmisón
Tute2: Procesamiento básico de imágenes en color en ImageJ
¿Qué son las fibras de estrés? Las fibras de estrés son estructuras citoesqueléticas de orden superior compuestas por haces de filamentos de actina reticulados y, en muchos casos, por proteínas motoras de miosina, que abarcan una longitud de 1-2 micrómetros [1]. Se han identificado al menos 4 tipos de fibras de estrés en las células de mamíferos [2]. Se trata de las fibras de tensión dorsales, las fibras de tensión ventrales, los arcos transversales y la tapa de actina perinuclear recientemente identificada, que es un importante mediador en la mecanotransducción nuclear. Cada tipo de fibra de estrés se define por su localización en la célula, su morfología y su función en las adhesiones focales (revisado en [3]). La presencia de proteínas motoras en las fibras de estrés permite la contractilidad, un factor importante en la función de las fibras de estrés y en la motilidad celular. En la mayoría de los casos, las fibras de estrés se conectan a las adhesiones focales y, por tanto, son cruciales en la mecano-transducción. En las células de mamíferos, las fibras de estrés se ensamblan y desensamblan continuamente. Esto les permite mantener la tensión celular y sufrir modificaciones en respuesta a diversas fuerzas (por ejemplo, el estrés mecánico [4][5]).
Neurociencia de 2 minutos: Serotonina
El citoesqueleto es un complejo de componentes insolubles en detergente del citoplasma que desempeñan funciones críticas en la motilidad celular, la generación de la forma y las propiedades mecánicas de una célula. Los polímeros fibrilares -filamentos de actina, microtúbulos y …más
Microscopía electrónica (EM), Secado supercrítico, Microscopía correlativa, Sombra (Histología), Cultivo de células y tejidos, Microscopía de luz, Fijación química, Etiquetado con inmunogold, Imágenes de células vivas, Microscopía de fluorescencia, TEM, Inmunotinción, Disección
El citoesqueleto es un complejo de componentes insolubles en detergente del citoplasma que desempeñan funciones críticas en la motilidad celular, la generación de la forma y las propiedades mecánicas de una célula. Los polímeros fibrilares -filamentos de actina, microtúbulos y …más
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Materiales – micrografías electrónicas de precipitados
), que contiene la dirección preferida en cada píxel.Fig. 2Mejora de la imagen anisotrópica. a, c Imágenes de células U2OS chapadas en un micropatrón en forma de ballesta antes (A) y después (C) de la mejora de la imagen mediante LFT y OFT (B). Cuadro azul: región que contiene dos filamentos paralelos de bajo contraste con el fondo. Recuadro púrpura: una zona que contiene un ruido tipo racimo y una estructura filamentosa. b Un filtro de mejora ilustrativo con una longitud total de 2r y un ángulo de rotación escalonado de θ. Barra de escala, 5 μm. d, e Imágenes ampliadas de los recuadros azul y púrpura en (A) y (B) respectivamente. Barra de escala, 1 μm. f Perfiles de intensidad normalizados de las regiones recortadas en verde (D, E, a la izquierda) de los recuadros azules de (A) y (B). g Perfiles de intensidad normalizados de las regiones recortadas en rojo (D, E, a la derecha) de los recuadros morados de (A) y (B).Imagen a tamaño completo
El paso LFT anterior sirve para mejorar las características lineales utilizando únicamente la información de la intensidad de la imagen. Sin embargo, además de la intensidad, las estructuras lineales también pueden reconocerse teniendo en cuenta las direcciones preferidas tanto del píxel base como de sus vecinos. Para incorporar esta información, para cada píxel realizamos un segundo filtro de transformación, OFT, para explorar si los píxeles vecinos a lo largo de θ
¿Qué fuerza tiene el grafeno?
ResumenLa corteza celular es una red de actina de aproximadamente 200 nm de grosor que se encuentra justo debajo de la membrana celular. Es responsable de las propiedades mecánicas de las células y, como tal, está implicada en muchos procesos celulares, como la migración celular y las interacciones celulares con el entorno. Para obtener una visión clara de esta densa estructura, es esencial la obtención de imágenes de alta resolución. Una de estas técnicas, la microscopía electrónica, implica complejos procedimientos de preparación de muestras. El secado final de estas muestras influye significativamente en los posibles artefactos, como la contracción celular y la formación de agujeros artificiales en la corteza de actina. En este estudio, comparamos los tres procedimientos de secado final de muestras más utilizados: el secado de punto crítico (CPD), el CPD con tejido de lente (CPD-LT) y el secado con hexametildisilazano. Demostramos que tanto el hexametildisilazano como el CPD-LT conducen a menos agujeros de malla artificiales dentro de la corteza de actina que el CPD. Además, el CPD-LT conduce a una reducción significativa de la altura de la célula en comparación con el hexametildisilazano y el CPD. Llegamos a la conclusión de que el procedimiento de secado final debe elegirse en función de la reducción de la altura de la célula, y por tanto CPD-LT, o en función de la separación espacial de las capas individuales de la corteza de actina, y por tanto hexametildisilazano.
